蛋白電泳（SPE）作為一種蛋白質(zhì)的分析技術(shù)，蛋白質(zhì)在緩沖液中帶負(fù)電荷或正電荷，在電場(chǎng)中向陽(yáng)極移動(dòng)稱(chēng)為電泳，不同的蛋白質(zhì)分子具有不同的電泳遷移率。常見(jiàn)的蛋白電泳有紙電泳、淀粉凝膠電泳、瓊脂糖凝膠電泳、醋酸纖維凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳。

其中十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳（sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis，簡(jiǎn)稱(chēng)SDS-PAGE）是聚丙烯酰胺凝膠電泳中zui常用的一種蛋白表達(dá)分析技術(shù)。此項(xiàng)技術(shù)的原理，是根據(jù)檢體中蛋白質(zhì)分子量大小的不同，使其在電泳膠中分離。

蛋白中含有很多的氨基(+)和羧基(-)，不同的蛋白在不同的pH值下表現(xiàn)出不同的電荷，為了使蛋白在電泳中的遷移率只與分子量有關(guān)，我們?cè)谏蠘忧?，通常?huì)進(jìn)行一些處理(上樣緩沖液)。即在樣品中加入含有SDS 和β-巰基乙醇的上緩沖液。

SDS 即十二烷基磺酸鈉（CH₃-(CH₂)₁₀-CH₂OSO₃- Na+），是一種陰離子表面活性劑，它可以斷開(kāi)分子內(nèi)和分子間的氫鍵，破壞蛋白質(zhì)分子的二級(jí)和三級(jí)結(jié)構(gòu)；β-巰基乙醇是強(qiáng)還原劑，它可以斷開(kāi)半胱氨酸殘基之間的二硫鍵。

電泳樣品加入樣品處理液后，經(jīng)過(guò)高溫處理，其目的是將SDS與蛋白質(zhì)充分結(jié)合，以使蛋白質(zhì)*變性和解聚，并形成棒狀結(jié)構(gòu)同時(shí)使整個(gè)蛋白帶上負(fù)電荷；另外樣品處理液中通常還加入溴酚藍(lán)染料，用于監(jiān)控整個(gè)電泳過(guò)程；另外樣品處理液中還加入適量的蔗糖或甘油以增大溶液密度，使加樣時(shí)樣品溶液可以快速沉入樣品凹槽底部。當(dāng)樣品上樣并接通兩極間電流后(電泳槽的上方為負(fù)極，下方為正極)，在凝膠中形成移動(dòng)界面并帶動(dòng)凝膠中所含SDS負(fù)電荷的多肽復(fù)合物向正極推進(jìn)。樣品首先通過(guò)高度多孔性的濃縮膠，使樣品中所含SDS多肽復(fù)合物在分離膠表面聚集成一條很薄的區(qū)帶（或稱(chēng)積層）。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)進(jìn)入分離膠時(shí)，其他離子在pH8.8的溶液中，很快到達(dá)正極，只有蛋白質(zhì)分子在分離膠中較為緩慢的移動(dòng)。由于蛋白質(zhì)在電泳過(guò)程中，受到溶液離子的變化而pH值發(fā)生變化，但每一瞬間，其所帶電荷數(shù)除以單位質(zhì)量是不同的，所以帶負(fù)電荷多者遷移快，反之則慢，這就現(xiàn)了電荷效應(yīng)。由于膠孔徑小，而且成為一個(gè)整體的篩狀結(jié)構(gòu)，它們對(duì)大分子阻力大，小分子阻力小，起著分子篩效應(yīng)，也就是蛋白質(zhì)在分離膠中，以分子篩效應(yīng)和電荷效應(yīng)而出現(xiàn)遷移率的差異，最終達(dá)到彼此分開(kāi)。

蛋白電泳是蛋白純化后期檢測(cè)的方法之一，整個(gè)的蛋白純化前期對(duì)于填料的選擇是至關(guān)重要的。月旭科技推出的蛋白純化填料包括凝膠過(guò)濾層析介質(zhì)、離子交換層析介質(zhì)、疏水作用層析介質(zhì)、親和層析介質(zhì)等，分離效果好，性?xún)r(jià)比高，是你的優(yōu)選。